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目录 contents

    摘要

    近年来,以超滤膜为核心的短流程工艺因其占地面积小、净水效率高备受关注,但随之而来的生物污染问题是阻碍长期运行的瓶颈。基于此,考察了紫外预处理作用下,短流程工艺长期运行条件下的膜污染行为。结果表明,一定程度的紫外预处理(180 μW·cm-2)能有效减缓短流程膜工艺的生物污染问题。运行60 d后,膜池中微生物的死亡/存活比率由39.90%/60.10%升高至66.40%/33.60%,滤饼层中胞外聚合物浓度为未经紫外预处理时的76.50%。此时,紫外预处理的跨膜压差上升至34.40 kPa,而未经紫外预处理的跨膜压差高达41.50 kPa。然而,紫外预处理由于灭菌范围广和不可持续性,导致膜表面滤饼层中的微生物群落结构和丰度几乎无变化。同时,紫外预处理对出水水质几乎无影响。

    Abstract

    In recent years, the shortened process with ultrafiltration (UF) membrane has shown excellent performance due to its small land use and high water purification efficiency. However, severe membrane fouling was induced by microorganisms after long time operation. Therefore, the corresponding behavior of UF membrane fouling was investigated with ultraviolet (UV) pretreatment. The results showed that UV pretreatment (180 μW·cm-2) could effectively slow down the bio-pollution. The dead/live rate of microorganisms in the membrane tank increased from 39.90%/60.10% to 66.40%/33.60% after running for 60 days. The concentration of extracellular polymeric substance released by microorganisms with UV pretreatment was 76.50% of that without UV pretreatment. In addition, the transmembrane pressure only increased to 34.40 kPa after 60 d of operation for this process with UV pretreatment, while it significantly increased to 41.50 kPa without UV pretreatment. Due to broad sterilization and unsustainable characteristics of UV pretreatment, little variation of microbial community and abundance in the cake layer was observed between these two processes. Moreover, the effluent quality was little influenced by UV pretreatment.

    丁燕燕, 王兴, 马百文, 等. 短流程膜工艺中紫外预处理对膜生物污染的影响 [J]. 环境工程学报, 2019, 13(1):1-8.

    近年来,超滤膜处理技术因其高效的截留作用被广泛应用于实际饮用水净化工[1,2,3]。以超滤为核心的净水工艺,污染物经过混凝处理后直接进入膜池,相比常规工艺极大地简化了工艺流程,称为短流程工[4]。短流程超滤工艺由于去除效率较高且占地面积小而备受关[5]。然而,膜污染问题一直是阻碍膜技术发展的主要限制因[6,7]。有研究表明,生物污染是阻碍膜反应器长期运行的主要瓶[8]

    除了造成通量下降和能耗增加,微生物释放的胞外聚合物(extracellular polymeric substance,EPS)还能导致严重的膜污染并且会恶化出水水[9]。因此,控制生物污染是短流程膜工艺长期运行的关键问题。迄今为止,一些可以降低生物污染的化合物,如银盐、呋喃西林和阳离子表面活性剂已用于水处[10,11,12]。但是,这些化合物由于其分子质量较小而可能恶化出水水质,加剧了饮用水健康风险。紫外照射已被广泛用于饮用水消毒。该技术主要采用物理灭活,直接分解微生物的遗传物质DNA,进而抑制细菌繁殖或者产生羟基自由基,抑制微生物生[13]。紫外处理的主要优点包括无需添加化学剂、空间需求最小化、接触时间短且不产生二次污染[14]。目前,紫外消毒多与臭氧、高锰酸盐或氯联合,用于常规水处理工艺以保证水质安[15,16];但紫外消毒工艺很少作为预处理措施单独用于缓解水中的生物污染,尤其是在短流程工艺中。基于此,本实验对比研究了紫外预处理-混凝-超滤的常规膜工艺和混凝-超滤短流程膜工艺的污染行为,考察了紫外预处理对超滤膜生物污染的影响,并从膜池水及膜表面滤饼层中的微生物种群结构及胞外聚合物浓度等方面进一步阐述了紫外预处理影响生物膜污染的作用机制。

    图1
                            实验装置图

    图1 实验装置图

    Fig.1 Schematic diagram of the experimental set-up

  • 1 材料与方法

    1
  • 1.1 实验原料与装置

    1.1

    实验中所用试剂均为分析纯,购自国药集团化学试剂有限公司(北京)。膜组件为聚偏氟乙烯(polyvinylidene fluoride,PVDF)所制中空纤维膜(平均孔径30 nm),膜面积0.025 m2。实验用水采用自配水模拟微污染地表水,所用污水取自中国科学院生态环境研究中心生活区污水井,以1/50比例混入放置3 d的自来水[8]。水质特征见表1。实验装置如图1所示。

    表1 原水水质特征

    Table 1 Characteristics of raw water

    pH温度/℃浊度/NTU平均粒径/nmTOC/(mg·L-1)NO3-/(mg·L-1)NH4+/(mg·L-1)Al3+/(mg·L-1)
    7.52 ± 0.1121.80 ± 1.702.97 ± 0.0821.70 ± 4.804.09 ± 0.263.62 ± 0.451.32 ± 0.240.05 ± 0.02
  • 1.2 实验方法

    1.2

    实验用原水经高位水箱进入恒位水箱(用浮球阀控制相应液面),将配置好的浓度为0.10 mol·L-1的Al2(SO4)3·18H2O溶液通过注射泵加入混凝池,使其在混凝池中的最终浓度为0.05 mol·L-1(以铝计算)。混凝搅拌的参数为300 r·min-1下快搅1 min后,100 r·min-1下慢搅14 min。混凝结束后直接进入膜池。原水在恒位水箱的水力停留时间为30 min。膜组件利用蠕动泵驱动恒通量运行,膜通量为20 L·(m2·h)-1,产水量为0.50 L·h-1。设备每运行30 min进行1次1 min的反洗(水量40 L·(m2·h)-1),在反洗的同时曝气(曝气流量100 L·h-1)。在紫外预处理组的恒位水箱中设置紫外辐射强度为180 μW·cm-2的紫外灯(低压灯系统适用于低流量水处理系统的应用,对应的单根紫外灯的紫外辐射强度≥100 μW·cm-2),使用真空表指示跨膜压差(transmembrane pressure, TMP),在实验过程中,每天记录TMP变化。

  • 1.3 分析方法

    1.3

    通过烧杯实验测定絮体的特性,利用激光粒度分析仪(Mastersize 2000,Malvern,UK)测定膜池内絮体粒[17]。用d50表示絮体的平均直[18]

    运行结束后,截取2 cm膜丝,将其置于含有3.00%戊二醛的pH 为7.20的0.10 mol·L-1磷酸盐缓冲液中以固定微生物,并用乙醇梯度脱[19]。在空气中干燥后,通过SU 8000扫描电子显微镜(scanning electron microscopy, SEM)(Hitachi,日本)观察膜表面形貌。

    图2
                            有/无紫外预处理的跨膜压差变化

    图2 有/无紫外预处理的跨膜压差变化

    Fig. 2 TMP development with/without UV

    NOTE: treatment over time

    通过激光共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscopy, CLSM)进一步观测滤饼层中细胞、蛋白质与多糖的分布。通过流式细胞仪(FACSCalibur 4CLR,BD Bioscience,美国)检测微生物活性,其中用SYBR Green I (Invitrogen,美国)染色所有细胞,用碘化丙啶(PI,Sigma,美国)染色死亡或细胞膜受损的细胞。使用ABI 7500实时定量PCR仪(Life Technologies,美国)通过荧光定量PCR(qPCR)对微生物浓度进行定量。滤饼层中的EPS使用热提法进行提取,膜池水中EPS的浓度测定方法为,将水样在20 000 r·min-1下离心2 min后,取上清液直接进行测定。使用牛血清白蛋白(BSA)制作蛋白质标准曲线,使用BCA试剂盒(天根,中国)测定蛋白质浓度,多糖标准曲线使用葡萄糖制作,使用硫酸苯酚法测定多糖的浓[20]

  • 2 结果与讨论

    2
  • 2.1 紫外预处理对膜生物污染的影响

    2.1

    在恒通量过滤的条件下,采用跨膜压差可以直观地显示膜污染程度,TMP成为膜污染直观的评价指标。运行期间跨膜压差的变化如图2所示。结果表明,长期运行后,一定程度的紫外预处理可以减缓膜污染。最开始阶段(阶段I),有/无紫外预处理时的跨膜压差增长速率相似,运行至第10 天时,有紫外预处理和无紫外预处理的TMP值分别为4.30 kPa和5.00 kPa。随着时间运行(阶段II),无紫外预处理的TMP增长速率较快。运行60 d时,有紫外预处理的TMP为34.40 kPa,而无紫外预处理的TMP值高达41.50 kPa。

    由图2可以看出,运行期间TMP增长的速率不同,可分为2个阶段。第1阶段(0~10 d),有/无紫外预处理时,TMP增长速率基本一致,在这一阶段紫外预处理对膜污染基本无影响;第2阶段(11~60 d),有紫外预处理时,TMP的增长速率偏低,表明紫外预处理有效减缓了膜污染。这种现象可能与不同阶段造成膜污染的主要因素不同有关。在实验初始阶段,膜池中微生物尚未生长,膜表面附着的微生物数量很少,其所分泌的EPS较少,此阶段TMP增加的主要原因可能是混凝剂水解絮体与水中颗粒物共同形成的滤饼层厚度增长(阶段I)。而由絮体粒径的测定结果(图3)可以看出有/无紫外预处理对絮体粒径几乎没有影响(无紫外预处理的絮体平均粒径(231.20 ± 8.40) μm;有紫外预处理的絮体平均粒径(229.70 ± 11.60) μm)。基于此,阶段I中膜表面生成的滤饼层性质相似,TMP增长速率几乎相同。然而,随着膜组件的长期运行,微生物在膜表面生长发育,大量的EPS被微生物释放,与絮体共同形成致密的滤饼层,造成严重的生物污染(阶段II)。在这一阶段,有紫外预处理的TMP增长速率低于无紫外预处理的TMP增长速率。这可能是因为紫外预处理一定程度上减少了进水中存活微生物的数量,导致膜表面附着的微生物较少,分泌的EPS较少,形成的滤饼层相对疏松。

  • 2.2 紫外预处理对微生物及胞外聚合物的影响

    2.2
    图3
                            膜池内有/无紫外预处理的絮体粒径

    图3 膜池内有/无紫外预处理的絮体粒径

    Fig. 3 Floc size in membrane tank with/without UV treatment

    微生物及其分泌物对膜的生物污染有着相当大的贡[21]。为了考察紫外预处理对微生物的影响,使用流式细胞仪对膜池水中的微生物进行了测定(图4)。结果表明,微生物的死亡/存活比例分别为66.40%/33.60%(紫外预处理)和39.90%/60.10%(无紫外预处理)。可以看出,紫外预处理能有效杀灭进水中的微生物,抑制微生物的生长,减少进入膜池水中的微生物数量。

    图4
                            流式细胞仪测定膜池水中微生物

    图4 流式细胞仪测定膜池水中微生物

    Fig. 4 Flow cytometry analysis of microorganisms in the membrane tank

    微生物活动产生的胞外聚合物是导致膜污染的重要因[22,23]。然而,有/无紫外预处理时,膜池水中EPS浓度相近(图5(a))。蛋白质和多糖的含量分别为(8.11 ± 0.93) mg·L-1 和(1.77 ± 0.23) mg·L-1(紫外预处理)与(8.55 ± 0.54) mg·L-1和(1.98 ± 0.08) mg·L-1(无紫外预处理)。在紫外预处理造成膜池内微生物数量明显减少的情况下,这种EPS浓度的相似性可能是因为紫外预处理的灭菌机制直接破坏微生物的DNA,并不破环微生物细胞膜的完整性,因而蛋白质与多糖无外泄。同时,紫外预处理并不会引起出水水质变化(表2)。

    随着运行时间的增加,滤饼层的出现不可避免。为了深入研究紫外预处理有效减缓膜生物污染的机制,进一步考察了滤饼层中的EPS浓度(图5(b))。观察发现,滤饼层中的EPS浓度表现出明显的差异:有紫外预处理的滤饼层中蛋白质与多糖浓度分别为(81.33 ± 1.31) μg·g-1和(12.53 ± 0.29) μg·g-1;而无紫外预处理的滤饼层中蛋白质和多糖的浓度分别高达(104.25 ± 1.94) μg·g-1和(18.44 ± 0.31) μg·g-1,无紫外预处理的滤饼层中蛋白质和多糖的浓度分别为紫外预处理的1.30倍和1.50倍。由此证实了紫外预处理减少了微生物在膜表面的附着和沉积,从而减少了可以引起严重膜生物污染的蛋白质与多糖的分泌。

    图5
                            有/无紫外预处理时膜池和滤饼层的蛋白质与多糖浓度

    图5 有/无紫外预处理时膜池和滤饼层的蛋白质与多糖浓度

    Fig. 5 Concentration of protein and polysaccharide in membrane tank and cake layer with/without UV treatment

    表2 出水水质特征

    Table 2 Characteristics of effluent

    出水水样pH浊度/NTUTOC/(mg·L-1)NO3-/(mg·L-1)NH4+/(mg·L-1)UV254/cm-1Al3+/(mg·L-1)
    无紫外预处理7.16 ± 0.110.02 ± 0.0022.01 ± 0.110.04 ± 0.0032.54 ± 0.360.95 ± 0.050.01 ± 0.003
    紫外预处理7.17 ± 0.150.02 ± 0.0032.02 ± 0.120.03 ± 0.0032.58 ± 0.200.95 ± 0.060.01 ± 0.002
  • 2.3 紫外预处理对滤饼层形貌的影响

    2.3

    膜表面滤饼层是影响膜污染的一个重要因素。为了考查紫外预处理对滤饼层的影响,采用扫描电镜与激光共聚焦显微镜对滤饼层进行了观测。由图6可以看出,有/无紫外预处理的滤饼层表面形貌较为相似,进一步表明紫外预处理对絮体本身的影响不大,而EPS含量更低(黄色区域)。

    图6
                            有/无紫外预处理的膜表面滤饼层SEM图

    图6 有/无紫外预处理的膜表面滤饼层SEM图

    Fig.6 SEM images of the cake layer on the membrane surface with/without UV treatment

    进一步通过CLSM考察了滤饼层中微生物、蛋白质和多糖在膜表面的分布,结果均呈现分散分布。与单独使用混凝剂相比,紫外预处理后,膜表面上所能观察到的微生物和EPS明显减少(图7)。而使用ImageJ计算积分光密度(IOD)后,无紫外预处理时膜表面上的微生物、蛋白质和多糖的浓度比紫外预处理后分别高约1.40倍(1 821/1 345)、1.40倍(2 785/1 982)和1.60倍(3 014/1 914)。无紫外预处理时滤饼层中微生物、蛋白质和多糖的浓度更高,故会导致更加严重的膜污染。

    图7
                            有/无紫外预处理的膜表面滤饼层ConA-Texas red染色、FITC染色和DAPI染色的CLSM图

    图7 有/无紫外预处理的膜表面滤饼层ConA-Texas red染色、FITC染色和DAPI染色的CLSM图

    Fig. 7 CLSM images stained by ConA-Texas red, FITC and DAPI of the cake layer on the membrane surface with/without UV treatment

    综上所述,紫外预处理能有效杀死进水中的微生物,导致膜表面附着的微生物数量减少,进而减少了微生物在膜表面的代谢分泌产生EPS,减缓了运行过程中膜表面的生物污染。这与得到的跨膜压差的变化结果是一致的。

  • 2.4 紫外预处理对膜表面微生物群落的影响

    2.4

    由于膜表面微生物群落结构与膜生物污染有着密切的关[24],故进一步考察了滤饼层中微生物群落结构的变化(图8)。荧光定量PCR结果(图8(a))显示:无紫外预处理的滤饼层中细菌浓度为(1.05 ± 0.04)×104 copies·ng-1,真菌浓度仅为(0.07 ± 0.01)×104 copies·ng-1;有紫外预处理的滤饼层中细菌浓度为(0.88 ± 0.03)×104 copies·ng-1,而真菌浓度为(0.05 ± 0.01)×104 copies·ng-1。细菌的浓度是真菌的10倍以上,表明滤饼层中占主导地位的微生物是细菌。另外,未经紫外预处理组的滤饼层中的细菌和真菌浓度分别约为紫外预处理组中的1.20倍和1.40倍。

    由于细菌在膜表面微生物群落中属于优势种群,故进一步考察了细菌的种群组成。如图8(b)所示,相对丰度排名前10的细菌分别为:变形菌(Proteobacteria)、拟杆菌(Bacteroidetes)、疣微菌(Verrucomicrobia)、硝化螺旋菌(Nitrospirae)、酸杆菌(Acidobacteria)、浮霉菌(Planctomycetes)、绿菌(Chlorobi)、蓝细菌(Cyanobacteria)、放线菌(Actinobacteria)与厚壁菌(Firmicutes),并且有/无紫外预处理2组之间的群落差异并不显著。无紫外预处理与紫外预处理的滤饼层中的主要细菌均为变形菌(Proteobacteria),相对含量分别为39.42%与39.87%,这可能与最初生物膜的形成相[25]。相对含量第2位的为拟杆菌(Bacteroidetes),分别为14.94%与15.22%。相对含量第3位的为疣微菌(Verrucomicrobia),分别为15.03%与15.27%。滤饼层中相对丰度较高的拟杆菌(Bacteroidetes)和疣微菌(Verrucomicrobia)对生物污染有着显著影响。之前的研究已经表明,拟杆菌(Bacteroidetes)对蛋白质和多糖具有很强的降解能力,而疣微菌(Verrucomicrobia)则可以显著降解多[25,26]

    由此可见,紫外预处理对膜表面的微生物群落结构基本无影响,可能是因为紫外灭菌效果的不可持续性(仅在原位水箱中),故2组微生物在膜池中所处的环境相似。同时,紫外灭菌具有广泛[27],在短时间内绝大多数细菌被灭活。因此,虽然紫外预处理减少了进水中的微生物数量,进而减少膜表面附着的微生物数量,但群落结构差异不大。

  • 3 结论

    3
    图8
                            有/无紫外预处理时滤饼层中的微生物及细菌群落组成

    图8 有/无紫外预处理时滤饼层中的微生物及细菌群落组成

    Fig. 8 Composition of microorganisms and bacteria community at phylum level in cake layer with/without UV treatment

    1) 一定程度的紫外预处理(180 µW·m-2)可以有效杀死进水中的微生物,运行60 d后,膜池中微生物的死亡/存活比率由39.9%/60.1%(无紫外预处理)提高至66.4%/33.6%(有紫外预处理)。这使得有紫外预处理时,滤饼层中微生物、蛋白质和多糖的浓度较低,所以膜污染程度较轻。第60 天时,紫外预处理的跨膜压差为34.40 kPa,而未经紫外预处理的跨膜压差高达41.50 kPa。

    2) 对于膜表面微生物群落,紫外辐射不会产生持续的抑菌效果,因此,有/无紫外预处理的膜池中环境类似,并且紫外灭菌范围广,从而导致2组膜表面滤饼层中的微生物群落结构相似。高通量测序表明,变形菌(Proteobacteria)是2组中的主要细菌,拟杆菌(Bacteroidetes)和疣微菌(Verrucomicrobia)的相对丰度也较高。

    3) 实验表明,紫外消毒作为预处理手段,有效减缓了短流程膜工艺长期运行中的生物污染问题。此外,紫外预处理不造成二次污染,对膜出水水质无影响。因此,在实际工艺中,在短流程膜工艺前端增加紫外灯照射,可以在一定程度上延长超滤膜的使用寿命。

  • 参 考 文 献

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丁燕燕

机 构:

1. 中国科学院生态环境研究中心,饮用水科学与技术重点实验室,北京 100085

2. 中国科学院大学,北京 100049

Affiliation:

1. Key Laboratory of Drinking Water Science and Technology, Research Center for Eco-Environmental Sciences, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100085, China

2. University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China

角 色:第一作者

Role:First author

邮 箱:13641209642@163.com

第一作者简介:丁燕燕(1994— ),女,硕士研究生。研究方向:膜应用及膜污染控制。E-mail:13641209642@163.com

王兴

机 构:

1. 中国科学院生态环境研究中心,饮用水科学与技术重点实验室,北京 100085

2. 中国科学院大学,北京 100049

Affiliation:

1. Key Laboratory of Drinking Water Science and Technology, Research Center for Eco-Environmental Sciences, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100085, China

2. University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China

马百文

机 构:中国科学院生态环境研究中心,饮用水科学与技术重点实验室,北京 100085

Affiliation:Key Laboratory of Drinking Water Science and Technology, Research Center for Eco-Environmental Sciences, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100085, China

角 色:通讯作者

Role:Corresponding author

邮 箱:bwma@rcees.ac.cnbwma@rcees.ac.cn

作者简介:马百文(1985— ),男,博士,助理研究员。研究方向:水质净化及膜污染控制。E-mail:bwma@rcees.ac.cn

梁义

机 构:天津膜天膜科技股份有限公司,膜材料与膜应用国家重点实验室,天津 300457

Affiliation:State Key Laboratory of Membrane Materials and Membrane Applications, Tianjin Motimo Membrane Technology Co. Ltd.,Tianjin 300457, China

金曙光,郑晓梅,张利田

角 色:中文编辑

Role:Editor

/html/teepc_cn/201807020/alternativeImage/e05f2a83-b63b-4305-b877-64451b2384f2-F001.jpg
pH温度/℃浊度/NTU平均粒径/nmTOC/(mg·L-1)NO3-/(mg·L-1)NH4+/(mg·L-1)Al3+/(mg·L-1)
7.52 ± 0.1121.80 ± 1.702.97 ± 0.0821.70 ± 4.804.09 ± 0.263.62 ± 0.451.32 ± 0.240.05 ± 0.02
/html/teepc_cn/201807020/alternativeImage/e05f2a83-b63b-4305-b877-64451b2384f2-F002.jpg
/html/teepc_cn/201807020/alternativeImage/e05f2a83-b63b-4305-b877-64451b2384f2-F003.jpg
/html/teepc_cn/201807020/alternativeImage/e05f2a83-b63b-4305-b877-64451b2384f2-F004.jpg
/html/teepc_cn/201807020/alternativeImage/e05f2a83-b63b-4305-b877-64451b2384f2-F005.jpg
出水水样pH浊度/NTUTOC/(mg·L-1)NO3-/(mg·L-1)NH4+/(mg·L-1)UV254/cm-1Al3+/(mg·L-1)
无紫外预处理7.16 ± 0.110.02 ± 0.0022.01 ± 0.110.04 ± 0.0032.54 ± 0.360.95 ± 0.050.01 ± 0.003
紫外预处理7.17 ± 0.150.02 ± 0.0032.02 ± 0.120.03 ± 0.0032.58 ± 0.200.95 ± 0.060.01 ± 0.002
/html/teepc_cn/201807020/alternativeImage/e05f2a83-b63b-4305-b877-64451b2384f2-F006.jpg
/html/teepc_cn/201807020/alternativeImage/e05f2a83-b63b-4305-b877-64451b2384f2-F007.jpg
/html/teepc_cn/201807020/alternativeImage/e05f2a83-b63b-4305-b877-64451b2384f2-F008.jpg

图1 实验装置图

Fig.1 Schematic diagram of the experimental set-up

表1 原水水质特征

Table 1 Characteristics of raw water

图2 有/无紫外预处理的跨膜压差变化

Fig. 2 TMP development with/without UV

图3 膜池内有/无紫外预处理的絮体粒径

Fig. 3 Floc size in membrane tank with/without UV treatment

图4 流式细胞仪测定膜池水中微生物

Fig. 4 Flow cytometry analysis of microorganisms in the membrane tank

图5 有/无紫外预处理时膜池和滤饼层的蛋白质与多糖浓度

Fig. 5 Concentration of protein and polysaccharide in membrane tank and cake layer with/without UV treatment

表2 出水水质特征

Table 2 Characteristics of effluent

图6 有/无紫外预处理的膜表面滤饼层SEM图

Fig.6 SEM images of the cake layer on the membrane surface with/without UV treatment

图7 有/无紫外预处理的膜表面滤饼层ConA-Texas red染色、FITC染色和DAPI染色的CLSM图

Fig. 7 CLSM images stained by ConA-Texas red, FITC and DAPI of the cake layer on the membrane surface with/without UV treatment

图8 有/无紫外预处理时滤饼层中的微生物及细菌群落组成

Fig. 8 Composition of microorganisms and bacteria community at phylum level in cake layer with/without UV treatment

image /

无注解

无注解

treatment over time

无注解

无注解

无注解

无注解

无注解

无注解

无注解

  • 参 考 文 献

    • 1

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    • 4

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